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細菌發(fā)酵罐的取樣與檢測方法

發(fā)布日期:[2025-02-06]     點(diǎn)擊率:

細菌發(fā)酵罐的取樣與檢測是監控發(fā)酵過(guò)程、確保產(chǎn)品質(zhì)量的重要環(huán)節,以下是常見(jiàn)的方法:

取樣方法

取樣時(shí)機:根據發(fā)酵工藝和監測需求確定取樣時(shí)間點(diǎn),一般在發(fā)酵前期、中期和后期分別取樣,以了解細菌生長(cháng)和代謝的不同階段情況。如在對數生長(cháng)期,可更頻繁地取樣監測生長(cháng)速率。

取樣工具:使用無(wú)菌的取樣器具,如無(wú)菌注射器、取樣管等。對于大型發(fā)酵罐,可能需要專(zhuān)門(mén)設計的取樣裝置,確保取樣過(guò)程中不引入雜菌且能代表發(fā)酵罐內的整體情況。

取樣操作:取樣前,對發(fā)酵罐取樣口進(jìn)行嚴格的消毒處理,可用酒精棉球擦拭或用蒸汽滅菌。然后,按照無(wú)菌操作要求,將取樣器具插入取樣口,抽取適量的發(fā)酵液樣品。取樣后,立即將樣品轉移至無(wú)菌容器中,并密封好,防止外界微生物污染。

細菌發(fā)酵罐

檢測方法

微生物檢測

細胞計數:采用顯微鏡直接計數法或平板菌落計數法。顯微鏡直接計數可快速得到細菌的總數量,但無(wú)法區分活菌和死菌;平板菌落計數則是將樣品稀釋后涂布在固體培養基上,培養后計數菌落數,能準確反映活菌數量。

形態(tài)觀(guān)察:通過(guò)革蘭氏染色等方法對細菌進(jìn)行染色,然后在顯微鏡下觀(guān)察其形態(tài)、大小、排列方式及染色特性等,初步判斷細菌的種類(lèi)和生長(cháng)狀態(tài)。

生理生化鑒定:進(jìn)行一系列生理生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、氧化酶試驗、過(guò)氧化氫酶試驗等,根據細菌對不同底物的利用情況和酶活性特征,進(jìn)一步鑒定細菌種類(lèi)。

理化指標檢測

pH 值測定:使用 pH 電極或 pH 試紙測定發(fā)酵液的 pH 值,了解發(fā)酵過(guò)程中酸堿度的變化,pH 值的異常波動(dòng)可能影響細菌的生長(cháng)和代謝產(chǎn)物的合成。

溶氧測定:利用溶氧電極測定發(fā)酵液中的溶解氧濃度,溶氧是影響好氧細菌生長(cháng)和代謝的重要因素,通過(guò)監測溶氧可優(yōu)化通氣和攪拌條件。

產(chǎn)物濃度測定:根據發(fā)酵產(chǎn)物的不同,采用相應的檢測方法,如高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、分光光度法等,測定目標產(chǎn)物的濃度,以評估發(fā)酵過(guò)程的效率和產(chǎn)物的產(chǎn)量。

此外,還可以通過(guò)檢測發(fā)酵液的黏度、電導率等參數,間接了解發(fā)酵過(guò)程中細菌的生長(cháng)和代謝情況。同時(shí),為保證檢測結果的準確性和可靠性,需定期對檢測儀器進(jìn)行校準和維護,并嚴格按照操作規程進(jìn)行檢測。


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